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透析袋在使用前需要做好哪些處理工作?
  • 發(fā)布日期:2020-11-18      瀏覽次數(shù):1222
    •   透析袋通常是由半透膜制成的袋狀容器。在生物大分子的制備過程中,除去鹽、少量有機溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品時都要用到透析的技術(shù)-透析袋。

        透析袋類型:
        商品透析袋制成管狀,其扁平寬度為24 mm~50 mm不等。為防干裂,出廠時都用10%的甘油處理過,并含有極微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),它們對蛋白質(zhì)和其它生物活性物質(zhì)有害,用前必須除去??上扔?0%乙醇煮沸1小時,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌,后用蒸餾水沖洗即可使用。實驗證明,50%乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。使用后的透析袋洗凈后可存于4℃蒸餾水中,若長時間不用,可加少量NaNO3,以防長菌。洗凈涼干的透析袋彎折時易裂口,用時必須仔細(xì)檢查,不漏時方可重復(fù)使用。
        新透析袋如不作如上的特殊處理,則可用沸水煮五至十分鐘,再用蒸餾水洗凈,即可使用。使用時,一端用橡皮筋或線繩扎緊,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿水,用手指稍加壓,檢查不漏,方可裝入待透析液,通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,透析的小分子量較大時,袋外的水和緩沖液過量進入袋內(nèi)將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質(zhì)溶液透析過夜時,體積增加50%是正常的。為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析,可在袋內(nèi)放一截兩頭燒圓的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
        檢查透析效果的方法是:用1% BaCl2檢查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 檢查NaCl、KCl等。
       
        儲存條件:
        透析袋可存放于10-29度;每次使用后將余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。
       
        透析袋使用前處理方法:
        1、把透析袋剪成適當(dāng)長度(10-20cm)的小段;
        2、在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘;
        3、用蒸餾水*清洗透析袋;
        4、放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘;
        5、冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時起取用透析袋是必須戴手套。
        6、用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,將之清洗干凈。
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