纖維素 DE-52采用平均粒徑為50μm的顆粒型親水高分子聚合物，表面又用大分子糖鏈接枝，使它有更高的比表面積和更好的生物兼容性，它在高流水下保持更高載量，同時又具有更好的分辨率。由于比表面積大，平衡和洗脫的時間也更短。它經(jīng)過接枝即使是純化病毒，質(zhì)粒等超大分子的物質(zhì)，載量基本保持不變。本產(chǎn)品物理和化學(xué)穩(wěn)定性好，使用壽命長，操作方便。
操作步驟：
1、
纖維素 DE-52的處理：DE52經(jīng)酸、堿處理，0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl平衡。
2、裝柱：將層析柱固定于滴定架上，柱底墊一圓形尼龍紗，出口接一細(xì)塑料管并關(guān)閉出水。將浸泡于0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl中的DE52沿玻璃棒倒入柱中，待DE52自然沉降3～5cm高時，吸除0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl，或松開出水口螺旋夾，控制流速1～2ml/min，同時連續(xù)加入DE52至所需高度。待DE52*沉降后，柱面放一圓形濾紙片。
3、平衡：松開出水口螺旋夾，以0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl平衡，控制流速為15滴/min，待流出液與洗脫液之pH值達(dá)到一致時，停止平衡。
4、待提取樣品的準(zhǔn)備：將蛋白裝入透析袋里，置4℃冰箱，對0.01mol/L pH8.6 Tris-Cl透析過夜。
5、加樣、洗脫與收集：用吸管吸去柱面液體，以毛細(xì)吸管沿柱壁加入樣品，樣品體積相當(dāng)于柱床體積的1%～2%，蛋白濃度為50～70mg。啟開出水口螺旋夾使樣品緩慢進(jìn)入柱床內(nèi)，并用少量洗脫液清洗柱壁；待液體進(jìn)入柱床后，以0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl洗脫，控制流速為14～16滴/min。分部收集器收集，紫外監(jiān)測，或人工收集，以紫外分光光度計(jì)分別測定每管280nm OD值，描繪洗脫液峰。
6、濃縮：將洗脫液的280nm OD上峰段與下峰段各管分別合并，裝入透析袋，以PEG濃縮至所需體積。
